Histologia
Métodos de Estudo - Microscópia
1- Introdução
2- Medidas
1 µm = 0,001 mm
1 nm = 0,001 µm
µm = micrometro
mm = milímetro
nm = nanometro
3- Limite de Resolução
- olho humano = 0,2 mm
- microscópio de luz (M.O.) = 0,2 µm
- microscópio eletrônico (M.E.) = 0,5 nm
4- Diâmetro de Células
- ovócito = 100 µm (maior célula humana)
- cel. epitelial = 15 a 20 µm
5- Preparação de Rotina
Fixador Desidratação Diafanização Coloração
Formol Alcool Xilol Hematosilina + Eosina
6- Coloração
Componentes Característica Cora estruturas Cor Nomenclatura
Hematoxilina Básica Ácida Azul Basófila
Eosina Ácida Básica Rosáceo Acidófila
(entender bem esta tabela)
Obs: 1 micrometro = µm = 1 mm / 1000
1 nanômetro = nm = 1 µm / 1000
Poder de Resolução: capacidade do olho humano de separar detalhes - limite: até 0,2 mm
Método de Preparação da Lâmina Histológica
1- Fixação "formol" + diluído = 12 a 24h (depende do tamanho do órgão)
2- Lavagem "H2O" = 12 a 24h (de acordo com o tempo que ficou no formol)
3- Desidatratação "alcool" = 70%, 80%....100% = série crescente de álcool para retirar o excesso do material
4- Diafanização "xilol" , vários banhos = torna a peça bem transparente
5- Parafina ou Paraplaste
6- Microtomo (microtomia) cortar em fatias = cuba de banho maria, gruda a fatia na lâmina
7- Xilol = retira a parafina para poder corar (este corante é dissolvido em água)
8- Hidratar (alcool + H2O) - Hematoxilina (azul, base) + Eosina (vermelho, ácido)
ácido cora base
base cora ácido
9- Como encheu de água, tem que fazer todo o processo inverso para desidratar, até por um bálsamo que gruda a lâmina para fechar.
Após esta explicação, aprendemos a ligar e desligar o microscópio, ver uma lâmina corretamente e desenhar uma estrutura.
Lembrar do lápis de cor azul e vermelho para a próxima aula!!!
Bjus
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